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如何正確使用凍存管進行樣本保存

更新時間:2025-07-23    點擊次數(shù):87

  

  凍存管樣本保存操作指南

  一、樣本預處理

  細胞樣本?

  消化后離心(1500rpm,5分鐘),棄上清,加入凍存液(如含5-10% DMSO的無血清凍存液)重懸,細胞濃度建議1×10^6/mL?

  凍存體積不超過凍存管容量的75%(如2mL凍存管裝1.5mL以內(nèi)),避免凍脹破裂?

  菌種樣本?

  瓷珠法?:刮取菌苔與瓷珠混合,吸除多余液體后凍存?

  甘油法?:菌液與50%甘油按1:1混合,終濃度25%甘油?

  二、凍存操作流程

  分裝與標記?

  使用耐低溫標簽或激光刻碼標記管體,避免信息丟失?

  擰緊管蓋(雙螺紋設計更佳),防止液氮滲入?

  降溫程序?

  梯度降溫?:4℃→-20℃→-80℃→液氮氣相層(-196℃),避免冰晶損傷細胞?

  程序降溫盒?:可替代手動梯度,實現(xiàn)均勻降溫?




  三、存儲注意事項

  存儲方式? ?風險控制?

  液氮氣相層 避免直接浸泡,防止管體爆裂?

  -80℃冰箱 確保溫度穩(wěn)定,避免反復凍融?

  四、復蘇與安全規(guī)范

  快速復溫?:37℃水浴中輕柔搖晃至冰晶融化,避免高溫長時間暴露?

  防護措施?:

  佩戴防凍手套、護目鏡,防止液氮濺傷或管體炸裂?

  復蘇操作在生物安全柜內(nèi)進行?

  五、常見問題

  滲漏風險?:檢查膠圈密封性,避免使用老化凍存管?

  冰塞現(xiàn)象?:均勻降溫可減少壓力積聚導致的管體破損?

  注:以上資料僅供參考,不作為實驗數(shù)據(jù),具體請咨詢品牌供應商或技術老師;

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